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董阳阳:“一滴血的旅程”:血流感染如何通过微生物检验确诊?

血液,奔流于我们体内的生命之河,本应是纯净的“无菌环境”。它通过血管网络为器官输送氧气与养分,同时依靠免疫系统清除外来入侵物。然而,一旦细菌、真菌等病原微生物突破皮肤、黏膜或局部免疫屏障侵入血液,便可能迅速繁殖并释放毒素,引发凶险的血流感染(BSI),如败血症、感染性休克或多器官功能衰竭,严重威胁生命。如何从一滴血中快速、准确地揪出这些“隐形杀手”,并找到克制它们的办法?微生物检验是实现这一目标的关键技术手段。

旅程起点:精准采集与“特殊培养皿”

旅程始于患者床边。采集血样前,护士会严格执行手部消毒,佩戴无菌手套,对穿刺部位(常选肘静脉)进行不少于30秒的严密消毒,待其完全干燥后再行穿刺。这样做可最大程度避免皮肤表面常驻菌群(如表皮葡萄球菌)污染血样。通常需从不同部位(如双臂)采集2-4套血样,每套包括一个需氧瓶和一个厌氧瓶——这如同布下天罗地网,既提高病原体检出率,又有助于鉴别真正的病原体与污染菌。采集量成人通常每瓶8-10 mL,婴幼儿则依体重精确计算。

血液被注入特制的血培养瓶中。这种瓶子并不简单:其中装有富含营养的培养液,如大豆酪蛋白消化物培养基,支持多种微生物生长。尤为重要的是,许多培养瓶还添加有树脂或活性炭等物质,用于吸附血液中可能存在的抗生素,消除其对微生物生长的抑制,从而提升检出机会。采集后血瓶应尽快送至实验室,延误可能导致某些娇弱病原体死亡。

旅程核心:恒温孵育与智能监测

血培养瓶被送入微生物实验室后,立即放入恒温摇床式的自动化血培养仪中,温度严格控制在35-37℃模拟人体环境。仪器每10-15分钟对培养瓶进行一次监测,通过感应微生物代谢产生的二氧化碳浓度变化,或监测气压、荧光信号等指标,判断是否有微生物生长。一旦检测到信号超越阈值,仪器便会发出阳性警报,提醒技术人员处理。

这个过程是时间与耐心的考验。常见细菌如大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等通常在1-3天内被检出;而某些苛养菌、厌氧菌或真菌(如念珠菌属)可能生长缓慢,需要延长培养至5天甚至更久。对于一些特殊病原体(如布鲁氏菌),必要时需培养2-4周。因此,血培养一般需5天无生长才可报阴性。

旅程关键:阳性后的“火眼金睛”

警报响起,意味着可能有“敌情”,旅程进入分秒必争的关键阶段:

革兰染色初筛:技术员在生物安全柜内无菌操作,抽取少量阳性培养液涂片,进行革兰染色。在显微镜下,这能在1小时内快速揭示微生物是革兰阳性菌(呈紫色)还是革兰阴性菌(呈红色),以及其基本形态(如球菌、杆菌、链状或簇状排列)。这如同给“杀手”画了第一张速写,为感染科医生提供早期经验性用药的宝贵线索,争取治疗时间。

分离纯化与鉴定:阳性培养液被分别接种到多种固体培养基上(如血平板、巧克力平板、麦康凯平板等),以满足不同微生物的营养需求。平板被放入35℃恒温孵箱,通常24-48小时后可见单个菌落形成。技术员根据菌落的大小、形态、颜色、溶血性等特征,初步判断菌种类型。

随后,挑取可疑菌落进行精确鉴定。传统生化鉴定(如氧化酶试验、触酶试验及糖发酵试验等)仍在使用,但当前更先进、快速的质谱技术(MALDI-TOF MS)可在几分钟内凭借蛋白质指纹图谱准确鉴定至种属水平。对于难培养或罕见病原体,分子生物学方法(如PCR、基因测序)也可发挥重要作用。这一步旨在准确锁定“元凶”的真实身份(如肺炎克雷伯菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA、或白色念珠菌等)。

药敏试验:鉴定同时,纯培养的细菌被用于药敏试验。目前最常用的是纸片扩散法(KB法)或自动化仪器法(如VITEK、Phoenix系统)。将菌液涂布药敏平板,贴上含不同种类及浓度抗生素的纸片,或使用内置药敏卡的仪器,经16-24小时孵育后,通过测量抑菌圈大小或最小抑菌浓度(MIC),判断细菌对各种抗生素的敏感程度。最终生成药敏报告,明确标识敏感(S)、中介(I)或耐药(R)。这份报告是医生精准选择“狙击武器”、实施目标治疗、避免抗生素滥用的核心依据。

旅程终点:精准治疗的基石

这滴血的旅程,从采集到报告,凝结成一份详尽的微生物检验报告。它系统性地回答了临床三个核心问题:有无血流感染?(依据涂片镜检、生长情况、采样套数及临床表现综合判断是否真实感染而非污染);谁是元凶?(准确鉴定病原体种类);什么武器最有效?(提供清晰药敏谱)。

结语:这份报告成为感染科、ICU等临床医生抗感染治疗的决策基石。它指导医生选择最有效的抗生素,及时调整经验用药,减少不必要的广谱抗生素暴露,缩短患者住院时间,降低病死率,并有助于医院感染控制的监测与干预。从一滴血的采集到最终报告的发出,每一步都凝聚着护理与检验人员的严谨操作、自动化设备的先进科技以及专业智慧的判断,共同守护着生命之河的纯净与健康。

(董阳阳 阜外华中心血管病医院 检验科)

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